western和ELISA處理樣本有何差別？

Western Blot 樣品制備要加蛋白裂解液（含有蛋白酶抑制劑），然后冰上研磨，收集于EP管，冰上裂解30min，4度12000rpm離心15min，取上清分裝，即得到蛋白樣品。建議直接電泳，多余的-80保存。建議分裝的蛋白每支略多于一次上樣量，一次性用完一支，避免反復凍融。

ELISA樣品，直接腦組織冰上勻漿，收集于EP管，同上一樣離心，大約220-250ul每支分裝（因為ELISA上樣量基本都是每孔100ul，做復孔，每個樣品2孔，就需要200ul，為了避免不夠2孔，分裝時要大于200ul每支），直接實驗。多余的-80保存，一樣避免反復凍融。

不過ELISA*好少量樣品進行預實驗，或者查閱文獻，看看大概組織里有多高濃度，選擇合適的試劑盒，測量范圍要與組織濃度相符。避免濃度過高測量不準，或者濃度過低，小于試劑盒*低可測濃度。