LN299【人膠質(zhì)瘤細(xì)胞】發(fā)貨時(shí)，保證細(xì)胞處于生長對數(shù)期；貼壁細(xì)胞達(dá)到75%以上匯合度，約1×106/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶；傳代次數(shù)4代以內(nèi)；凍存細(xì)胞發(fā)2個(gè)凍存管；無微生物污染。
LN299【人膠質(zhì)瘤細(xì)胞】描述
細(xì)胞生長：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞數(shù)量：1×106個(gè)
細(xì)胞傳代：1:3傳代,2-3天傳一代
細(xì)胞純度：92.2％
細(xì)胞活力：88.4％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
細(xì)胞檢測：細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、**、酵母和**
細(xì)胞凍存：液氮凍存（完全培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS）
細(xì)胞運(yùn)輸：干冰運(yùn)輸（1 Vial）或活細(xì)胞運(yùn)輸（T-25 flasks）
細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和**
LN299【人膠質(zhì)瘤細(xì)胞】培養(yǎng)條件
DMEM,90%；上等胎牛血清，10%
氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%
溫度：37攝氏度
收到細(xì)胞后如何操作：
首先，觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請及時(shí)與我司聯(lián)系。
用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出進(jìn)行觀察。仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
可將培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管中，備用；細(xì)胞傳代時(shí)，可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合使用，讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件。
確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好后，應(yīng)及時(shí)將細(xì)胞凍存，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)，避免后期實(shí)驗(yàn)失誤可能發(fā)生細(xì)胞污染或死亡而導(dǎo)致的細(xì)胞丟失。
建議客戶收到細(xì)胞后前3天，100X、200X、400X各拍3-5張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)支持溝通交流。
預(yù)防細(xì)胞污染的注意事項(xiàng)：
1.實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺臺面，并開啟超凈臺風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)5-10min再開始實(shí)驗(yàn)操作。
2.實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺內(nèi)；實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺，以利于空氣的流通；實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺臺面。
3.每次操作只處理一種細(xì)胞；即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細(xì)胞間的交叉污染。
4.操作時(shí)小心取用無菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應(yīng)立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，容器打開后，傾斜45°操作，操作完成后及時(shí)蓋上瓶蓋。
5.CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方，應(yīng)1-2個(gè)月對培養(yǎng)箱定期進(jìn)行清潔**。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，*后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無菌水（應(yīng)每周更換），待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細(xì)胞。
6.定期清洗或更換超凈臺過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
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